Сельскохозяйственная биология, 2012, № 6, с. 61-65.

doi: 10.15389/agrobiology.2012.6.61rus

УДК 636.52/.58:591.324:576.3/.7.086.83:591.04

ВЫДЕЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ПРИМОРДИАЛЬНЫХ ЗАРОДЫШЕВЫХ КЛЕТОК КУР

Е.К. ТОМГОРОВА¹, Н.А. ВОЛКОВА¹, Л.А. ВОЛКОВА¹, В.И. ФИСИНИН², Н.А. ЗИНОВЬЕВА¹

Оптимизированы условия выделения примордиальных зародышевых клеток кур (кросс Птичное) из 4-8-суточных эмбрионов. Установлено, что эффективным методом дезагрегации куриных эмбрионов с целью получения эмбриональных клеток служит ферментативная обработка 0,05 % трипсином. Максимальное количество примордиальных зародышевых клеток может быть выделено из 6-суточных эмбрионов с последующим разделением суспензии клеток по адгезии после 90 мин культивирования при использовании эмбриональных фибробластов кур в качестве фидерного слоя. При инкубации ПЗК на фидерном слое жизнеспособность клеток сохранялась более длительное время — от 5 до 7 сут в зависимости от типа клеток, используемых в качестве фидерного слоя (перевиваемая клеточная линия STO, свежеизолированные и культивируемых в течение нескольких пассажей эмбриональных фибробластов кур).

Ключевые слова: цыплята, эмбрионы, примордиальные зародышевые клетки, условия выделения.

Полный текст

ISOLATION AND CHARACTERISTICS OF PRIMORDIAL GERM CELLS IN CHICKEN

Е.К. Tomgorova¹, N.A. Volkova¹, L.A. Volkova¹, V.I. Fisinin², N.A. Zinovieva¹

Optimized conditions for isolation of primordial germ cells in chicken and their description are given. Trypsinization (with 0.05 % trypsin) was found to be the most effective method of disaggregation in chick embryos for isolation of their embryonic cells. The maximum number of primordial germs cells can be isolated from 6 days-old embryos, followed by separation of the resulting cell suspension by adhesion after 90 minutes of their cultivation with the use of chicken embryonic fibroblasts as feeder layer. During incubation of primordial germ cells on feeder layer cells remained viable for a longer time, and ranged from 5 to 7 days, depending on the type of cells used as feeder layer (finite cell line STO, recently separated and incubated for several passages in chicken embryo fibroblasts).

Keywords: chicken, embryos, primordial germ cells, conditions for isolation.

Оформление электронного оттиска