doi: 10.15389/agrobiology.2023.4.757rus
УДК 591.2:616-093/-098:591.111(470.342)
Финансирование осуществлялось на основании смет, утвержденных Россельхозакадемией (2005-2010 годы) и программ ФНИ государственных академий наук FSZZ-2019-0001 (АААА-А19-119020190132-5).
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ У РЕЗЕРВУАРНЫХ ХОЗЯЕВ ПРИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗАХ
М.А. ПЕРЕВОЗЧИКОВА ✉, И.А. ДОМСКИЙ, Ю.А. БЕРЕЗИНА,
А.А. СЕРГЕЕВ
В настоящее время наблюдается широкое распространение природных очагов иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ, болезнь Лайма) в странах Европы, Азии, Австралии и Америки, а также высокая зараженность людей и животных. Исследования показали, что эта новая природноочаговая инфекция занимает ведущее место по заболеваемости и социально-экономическому ущербу. Многие патогенные микроорганизмы, включая Вorrelia burgdorferi, вызывающие заболевания у людей и животных, сохраняются в определенных природных очагах. На различных стадиях развития клещи питаются на разных животных. Размер популяции клещей главным образом зависит от количества резервуарных хозяев взрослых особей. В представленной работе впервые установлены биохимические показатели сыворотки крови у резервуарных хозяев ИКБ, имеющих диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi, которые свидетельствует о патологическом влиянии возбудителя на организм диких животных, развитии полиорганной недостаточности и нанесении вреда их здоровью. Нашей целью было изучение природных очагов иксодовых клещевых боррелиозов и получение новых данных об эпизоотологии заболевания, включая оценку влияния паразитизма иксодовых клещей, инфицированных В. burgdorferi, на химический состав крови резервуарных хозяев — зайца-беляка и лося. В качестве материала для исследования использовали сыворотку крови от взрослых самцов зайца-беляка (n = 11), в том числе 5 образцов, которые в непрямой реакции иммунофлуоресценции (НРИФ) имели диагностически значимые титры антител к B. burgdorferi (1:40 и 1:80), и 6 образцов, которые не имели диагностически значимых титров антител к B. burgdorferi (контроль). Также исследовали сыворотку крови от лосей (n = 114) различных половозрастных групп (молодняк в возрасте 6-7 мес и взрослые особи), в том числе 24 образца, которые имели диагностически значимые титры антител к B. burgdorferi, и 90 образцов, отобранных от клинически здоровых животных в Кировской области, включая особей, сыворотки которых в НРИФ не имели диагностически значимых титров антител к B. burgdorferi. Животных добывали при научном отстреле в сезоны осенней охоты 2005-2020 годов. Пробы крови для лабораторных исследований брали из яремной вены сразу после отстрела животного. Обнаружение противоборрелиозных антител в сыворотке крови осуществляли в НРИФ с использованием корпускулярного антигена B. afzelii (штамм Ip-21) и люминесцирующей иммунной сыворотки, меченной флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ), против глобулинов различных видов животных (кролик, собака, бык, свинья, курица). Биохимические исследования сыворотки крови проводили на полуавтоматическом анализаторе Biochеm SA («High Technology, Inc.», США) с набором реагентов («Эко-Сервис», Россия) для определения концентрации аспартатаминотрансферазы (AСT), аланинаминотрансферазы (АЛТ), щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы (ЛДГ), альфа-амилазы, общего белка, альбумина, общего билирубина, прямого билирубина, креатинина и холестерина. Выявлено, что животные, в сыворотке крови которых в НРИФ были обнаружены диагностически значимые титры антител к B. burgdorferi, имели статистически значимые (p < 0,05) различия в активности АСТ, АЛТ, щелочной фосфатазы, содержании общего белка, общего и прямого билирубина, креатинина. Так, у зайца-беляка с диагностически значимыми титрами антител к B. burg-dorferi активность АСТ была выше на 342,2 % по сравнению с животными без титров. Отмечено увеличение активности АСТ у лосей: на 35,0 % — у молодых самок, на 35,3 % — у молодых самцов, на 31,2 % — у взрослых самок, на 24,0 % — у взрослых самцов. Активность АЛТ у зайца-беляка с диагностическими титрами к B. burgdorferi оказалась выше на 32,8 % по сравнению с контролем. Увеличение активности АЛТ установлено и у лосей: на 53,8 % — у молодых самок, на 90,4 % — у молодых самцов, на 188,6 % — у взрослых самок, на 173,9 % — у взрослых самцов. Значение коэффициента де Ритиса для зайца-беляка свидетельствовало о преобладании патологии сердца, а у лосей, напротив, — о поражении печени. Отмечено повышение (p < 0,05) активности щелочной фосфатазы при боррелиозе у взрослых лосей (на 132,5 % у самок и на 206,3 % у самцов) и снижение количества фермента у молодых самок. У зайца-беляка выявлено повышение содержания общего билирубина на 42,4 %, у молодых самок лосей — на 86,1 %, у молодых самцов — на 121,9 %, у взрослых самок — на 118,8 %, у взрослых самцов — на 70,4 %. Также у самцов лосей было повышено содержание прямого билирубина: на 59,1 % у молодых и на 102,8 % у взрослых. Установлено повышение количества общего белка во всех группах животных, имеющих диагностически значимые титры антител к B. burgdorferi: у зайца-беляка — на 123,6 %, у молодых самок лосей — на 24,3 %, у молодых самцов — на 53,5 %, у взрослых самок — на 76,7 %, у взрослых самцов — на 19,9 %. Развитие почечной недостаточности привело к повышению количества конечного продукта обмена веществ — креатинина на 40,7 % у зайцев, имеющих диагностические титры антител к B. burgdorferi. Однофакторный анализ (ANOVA) позволил установить достоверное влияние B. burgdorferi на повышение в сыворотке крови концентрации общего белка, общего и прямого билирубина, креатинина, активности аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы. Полученные данные свидетельствуют о том, что боррелиоз у резервуарных хозяев протекает на фоне полиорганной недостаточности, и указывают на патологическое влиянии возбудителя на организм животных.
Ключевые слова: Вorrelia burgdorferi, иксодовые клещи, резервуарные хозяева, Alces alces, Lepus timidus, биохимия крови, сыворотка крови.
BLOOD BIOCHEMICAL PARAMETERS IN RESERVOIR HOSTS UNDER IXODID TICK-BORNE BORRELIOSIS
M.A. Perevozchikova ✉, I.A. Domsky, Yu.A. Berezina, A.A. Sergeev
Currently, there is a wide distribution of natural foci of ixodid tick-borne borreliosis (ITB, Lyme disease) in Europe, Asia, Australia and America, as well as high infection rate of people and animals. Studies have shown that this new natural focal infection occupies a leading position in terms of morbidity and socio-economic damage. Many pathogenic microorganisms, including Borrelia burgdorferi, which cause disease in humans and animals, persist in certain natural foci. Ticks feed on different animals at different stages of development. The size of the tick population mainly depends on the number of adult reservoir hosts. The research, for the first time, revealed in ITB infection reservoir hosts with diagnostically significant titers of antibodies to В. burgdorferi the blood serum biochemical parameters which indicate the pathological effect of the pathogen on the body of wild animals, the development of multiple organ failure and harm to their health. The aim was to study the natural foci of ixodid tick-borne borreliosis and to obtain new data on the epizootology of the disease, including an assessment of the effect of parasitism of ixodid ticks infected with B. burgdorferi on the blood chemical composition of reservoir hosts, the mountain hare and moose. Blood serum from adult males of mountain hare (n = 11) was used, including 5 samples that had diagnostically significant titers of antibodies to B. burgdorferi in the indirect immunofluorescence reaction (IRIF) (1:40 and 1:80), and 6 samples that did not have diagnostically significant titers of antibodies to B. burgdorferi (control). We also studied blood serum from moose (n = 114) of different sex and age groups (animals aged 6-7 months and adults), including 24 samples with diagnostically significant titers of antibodies to B. burgdorferi and 90 samples from clinically healthy animals (Kirov region), including individuals whose sera in the NRIF did not have diagnostically significant titers of antibodies to B. burgdorferi. Animals were hunted during scientific shooting during the autumn hunting seasons of 2005-2020. Blood samples for laboratory studies were taken from the jugular vein immediately after the animal was shot. Anti-borreliosis antibodies in blood serum was detected in NRIF test using B. afzelii corpuscular antigen (strain Ip-21) and fluorescein isothiocyanate (FITC) labeled luminescent immune serum against globulins of various animal species (rabbit, dog, bull, pig, chicken). Biochemical studies of blood serum were performed using a semi-automatic analyzer Biochem SA (High Technology Inc., USA) with a set of reagents (Eco-Service, Russia) to measure the concentration of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase (LDH), alpha-amylase, total protein, albumin, total bilirubin, direct bilirubin, creatinine and cholesterol. It was found that the animals with diagnostically significant titers of antibodies to B. burgdorferi had statistically significant (p < 0.05) differences in the activity of AST, ALT, alkaline phosphatase, the content of total protein, total and direct bilirubin, creatinine. Thus, in a hare with diagnostically significant titers of antibodies to B. burgdorferi, AST activity was 342.2 % higher compared to animals without titers. An increase in AST activity in moose was noted, by 35.0 % in young females, by 35.3 % in young males, by 31.2 % in adult females, and by 24.0 % in adult males. ALT activity in hare with diagnostic titers to B. burgdorferi was 32.8 % higher compared to the control. An increase in ALT activity was also found in moose, by 53.8% in young females, by 90.4 % in young males, by 188.6 % in adult females, and by 173.9 % in adult males. In hare, the value of the de Ritis coefficient testified to the predominance of the heart pathology, and in moose, on the contrary, to liver damage. An increase (p < 0.05) in the activity of alkaline phosphatase during borreliosis in adult moose was noted, by 132.5 % in females and by 206.3 % in males, and a decrease in the enzyme activity in young females. In hare, an increase in the content of total bilirubin by 42.4 % was revealed, in young female moose by 86.1 %, in young males by 121.9 %, in adult females by 118.8 %, in adult males by 70.4 %. In addition, the content of direct bilirubin increased in male moose, by 59.1 % in young and by 102.8 % in adults. The amount of total protein in all groups of animals with diagnostically significant antibody titers to B. burgdorferi increased: in hare by 123.6 %, in young female moose by 24.3 %, in young males by 53.5 %, in adult females by 76.7 %, in adult males by 19.9%. In hares with diagnostic titers of antibodies to B. burgdorferi, the renal failure led to a 40.7 % increase for creatinine, the end product of metabolism. Univariate analysis (ANOVA) allowed us to establish a significant effect of B. burgdorferi on the increase in serum concentrations of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, total protein, total and direct bilirubin, and creatinine. The data obtained indicate multiple organ failure in reservoir hosts under borreliosis and pathological effects of B. burgdorferi on animals.
Keywords: Borrelia burgdorferi, ixodid ticks, reservoir hosts, Alces alces, Lepus timidus, blood biochemistry, blood serum.
ФГБНУ Всероссийский НИИ охотничьего |
Поступила в редакцию |
