doi: 10.15389/agrobiology.2024.2.355rus
УДК 636.2:619:615.246
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА ПРОТОСТОП ПРИ ДИАРЕЯХ СМЕШАННОЙ ПАРАЗИТАРНО-БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЭТИОЛОГИИ У МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
С.В. ЕНГАШЕВ1 ✉, Л.М. БЕЛОВА2, Н.А. ГАВРИЛОВА2,
А.В. ЗАБРОВСКАЯ2, Л.И. СМИРНОВА2, Е.С. ЕНГАШЕВА1,
Ю.А. ДЬЯЧКОВА2
При выращивании крупного рогатого скота серьезной проблемой остаются болезни желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) молодняка с диарейным синдромом, распространенные практически повсеместно и охватывающие большую часть поголовья. Достаточно часто диагностируют болезни ЖКТ телят паразитарно-бактериальной, паразитарно-вирусной этиологии, в том числе комбинации Cryptosporidium spp. с Escherichia coli, энтеробактериями родов Salmonella, Klebsiella. В таких случаях оптимально использование препаратов широкого спектра, обладающих антимикробным и противопротозойным действием. В настоящей работе впервые показано воздействие препарата, содержащего паромомицина сульфат, на возбудителей болезней ЖКТ телят как паразитарного, так и бактериального происхождения. Установлена минимальная ингибирующая концентрация (МИК) сульфата паромомицина для возбудителей болезней ЖКТ телят бактериальной этиологии: Salmonella Dublin, Escherichia coli с гемолитическими свойствами, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Citrobacer freundii. Нашей целью было изучение терапевтической эффективности препарата Протостоп (д.в. сульфат паромомицина) при болезнях желудочно-кишечного тракта с диарейным синдромом у телят. Исследования проводили в июле-августе 2021 года (животноводческий комплекс, Ленинградская обл., Ломоносовский р-н) на молодняке крупного рогатого скота (Bostaurus) черно-перстной породы в возрасте до 5 мес (масса от 30 до 50 кг). Из прямой кишки телят с клиническими признаками нарушения функции ЖКТ брали пробы фекалий (20-40 г). Для обнаружения ооцист Cryptosporidium spp. готовили мазки на предметном стекле, которые окрашивали с использованием набора реагентов Диахим-Набор для окрашивания по Цилю-Нильсену (НПФ «Абрис+», Россия) и исследовали (микроскоп Primo Star, «Carl Zeizz», Германия). Для установления количественного и видового состава энтеробактерий 10-кратные разведения фекалий в физиологическом растворе высевали по 0,05 мл на питательную среду Эндо (ООО «Научно-исследовательский центр фармакотерапии», Россия). Для оценки терапевтической эффективности препарата Протостоп (порошок, в 1 г препарата содержится 100 мг сульфата паромомицина; ООО «НВЦ Агроветзащита», Россия) отбирали животных, в фекалиях которых были обнаружены ооцисты Cryptosporidium spp., штаммы гемолитической E. coli и условно-патогенных микроорганизмов. Сформировали 5 групп животных по 10 гол. в каждой. Телятам из 1-4-й групп (опыт) давали препарат Протостоп индивидуально перорально один раз в сутки. Перед применением разовую дозу препарата растворяли в воде, добавляя жидкость к порошку. Животные из 1-й группы получали препарат в дозе 250 мг/кг массы животного в течение 3 сут, телятам из 2-й группы давали препарат в той же дозе в течение 5 сут. Животные в 3-й и 4-й группах получали Протостоп в дозе 350 мг/кг массы соответственно в течение 3 и 5 сут. Телятам из контрольной группы была проведена терапия препаратом-аналогом (Парофор 70, порошок, в 1,0 г препарата содержится 100,0 мг сульфата паромомицина; «Biovet AD», Болгария). Препарат применяли в дозе 350 мг/кг массы тела перорально 1 раз в сутки в течение 5 сут. При клиническом осмотре на 3-и, 5-е, 10-е и 14-е сут от начала приема препаратов оценивали общее состояние животных, потребление ими воды и корма, изменения функции ЖКТ, состояние слизистых оболочек и шерстного покрова. Копрологические исследования на наличие ооцист Cryptosporidium spp. проводили на 8-е и 12-е сут лечения, бактериологические — на 10-е сут после окончания лечения. Состояние животных всех групп оценивали на основании общего анализа крови. МИК сульфата паромомицина — действующего вещества препарата Протостоп определяли методом серийных разведений согласно ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010. Штаммы, для которых МИК сульфата паромомицина не превышала 4 мкг/мл, относили к чувствительным, выше 4 мкг/мл — к резистентным. При паразитологическом исследовании в фекалиях телят в поле зрения микроскопа находилось более 25 ооцист Cryptosporidium spp., что свидетельствует о высокой интенсивности инвазии. При бактериологическом исследовании были обнаружены штаммы Escherichia coli, обладающие гемолитической активностью, и другие штаммы условно-патогенной микрофлоры. После использования препарата у всех телят подопытных групп отмечалось значительное улучшение общего состояния: животные стали более активными, диарея прекратилась, фекальные массы приобрели кашицеобразную консистенцию, характерную для фекалий крупного рогатого скота. Препарат Протостоп в дозе 350 мг/кг массы животного, применяемый перорально с водой 1 раз в сутки в течение 5 сут, имел выраженное терапевтическое действие. Через 8 сут после начала лечения по указанной схеме в фекалиях отсутствовали ооцисты Cryptosporidium spp., через 10 сут после окончания лечения штаммы гемолитической Escherichia coli и других условно-патогенных энтеробактерий отсутствовали в разведении фекалий 1:10. Терапевтическая эффективность препарата Протостоп при использованных дозировке и длительности применения была выше эффективности препарата Парофор 70 в дозе 350 мг/кг. МИК сульфата паромомицина для штаммов Salmonella Dublin и Citrobacter freundii составила 2 мкг/мл, что позволяет отнести их к микробиологически чувствительным к этому препарату. Остальные штаммы были микробиологически устойчивыми: для гемолитической Escherichia coli МИК составила от 128 до более 256 мкг/мл, для Enterobacter cloaceae, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris — более 256 мкг/мл.
Ключевые слова: паромомицин, криптоспоридиоз, минимальная ингибирующая концентрация, Escherichia coli, телята, болезни желудочно-кишечного тракта.
THE PROTOSTOP DRUG EFFECTIVENESS IN DIARRHEA OF MIXED PARASITIC-BACTERIAL ETIOLOGY IN CALVES
S.V. Engashev1 ✉, L.M. Belova2, N.A. Gavrilova2,
A.V. Zabrovskaia2, L.I. Smirnova2, E.S. Engasheva1,
Ju.A. Dyachkova2
In cattle breeding, diseases of the gastrointestinal tract (GIT) of calves with diarrheal syndrome, which are widespread almost everywhere and involve most of the livestock, remain a serious problem. Gastrointestinal diseases of calves of mixed, parasitic-bacterial and parasitic-viral etiology are often noted, a combination of Cryptosporidium spp. with Escherichia coli, enterobacteria of the genus Salmonella, Klebsiella have been detected. Thereof, it is optimal to use broad-spectrum drugs that have antimicrobial and antiprotozoal effects. This article presents for the first time the effect of the drug paromomycin sulfate on pathogens of gastrointestinal diseases of both parasitic and bacterial origin. The minimum inhibitory concentration (MIC) of paromomycin sulfate has been established for pathogens of gastrointestinal tract diseases of calves of bacterial etiology, i.e., Salmonella Dublin, Escherichia coli with hemolytic properties, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Citrobacer freundii. The aim of study was to examine the therapeutic effectiveness of the drug Protostop (the active substance is paromycin sulfate) for diseases of the gastrointestinal tract with diarrheal syndrome in calves. The research was carried out at a cattle farm (Leningrad Province, Lomonosovsky District) in July-August 2021. The experiments involved calves (Bos taurus) of the black-white breed, up to 5 months old, weighing from 30 to 50 kg. Fecal samples weighing 20-40 g were taken from the rectum of calves with clinical signs of gastrointestinal dysfunction. To detect oocysts of Cryptosporidium spp. fecal smears were prepared on a glass slide, and stained using a Diakhim-Kit for Ziehl-Neelsen staining (NPF Abris+, Russia). Microscopy was performed using a Primo Star microscope (Carl Zeizz, Germany). To establish the quantitaty and species of enterobacteria, 10-fold dilutions of feces in saline solution were sown in 0.05 ml quantities on the Endo nutrient medium (LLC Research Center for Pharmacotherapy, Russia). To assess the therapeutic effectiveness of the drug Protostop (powder, 1 g of the drug contains 100 mg of paromomycin sulfate; AVZ Ltd, Russia), animals in whose feces consist oocysts of Cryptosporidium spp., strains of hemolytic E. coli and opportunistis microorganisms were selected. We formed 5 groups of animals of 10 animals in each (4 experimental, 1 control). All calves in experimental groups were given the drug Protostop individually, orally, once a day. Before use, a single dose of the drug was dissolved in water by adding the liquid to the powder. Animals from the 1st group received the drug at a dose of 250 mg/kg of body weight for 3 days, calves from the 2nd group were given the drug at the same dose for 5 days. Animals of the 3rd and 4th groups received Protostop at a dose of 350 mg/kg body weight, respectively, for 3 and 5 days. Calves from the control group were treated with an analog drug Parofor 70 (powder, 1.0 g of the drug contains 100.0 mg of paromomycin sulfate; Biovet AD, Bulgaria). The drug was administered at a dose of 350 mg/kg body weight orally once a day for 5 days. During a clinical examination on the 3rd, 5th, 10th and 14th days from the start of treatment, the health condition of the animals, their consumption of water and feed, the presence of changes in the function of the GIT, the condition of the mucous membranes and coat were examined. Coprological studies for the presence of oocysts of Cryptosporidium spp. were carried out on the 8th and 12th days of treatment, bacteriological on the 10th day after the end of treatment. To assess the health condition, blood samples for examination was taken in all groups. The MIC of paromomycin sulfate, the active substance of the drug Protostop, was determined by the method of serial dilutions according to GOST R ISO 20776-1-2010. Strains for which the MIC of paromomycin did not exceed 4 μg/ml were classified as susceptible, and those above 4 μg/ml were classified as resistant. A parasitological study revealed more than 25 oocysts of Cryptosporidium spp. in the feces of calves in the field of view, which indicated a high intensity of invasion. A bacteriological study revealed Escherichia coli strains with hemolytic activity and other strains of opportunistic microflora. After treatment, all calves in the experimental groups showed significant improvements in their health condition: the animals became more active, diarrhea stopped, and the feces became a mushy consistency, characteristic of cattle feces. The drug Protostop had a pronounced therapeutic effect at a dose of 350 mg/kg of animal weight, administered orally with water, once a day, for a course of 5 days. 8 days after the start of treatment according to the indicated regimen, there were no Cryptosporidium spp. oocysts in the feces; 10 days after the end of treatment, strains of hemolytic Escherichia coli and other opportunistic enterobacteria were absent in a 1:10 dilution of feces. The therapeutic effectiveness of the drug Protostop at the indicated dosage and duration of use is higher than the effectiveness of the drug Parofor 70 at a dose of 350 mg/kg. The MIC of paromomycin for Salmonella Dublin and Citrobacter freundii strains was 2 μg/ml, which allows them to be classified as microbiologically susceptible to this drug. The remaining strains were microbiologically resistant, for hemolytic Escherichia coli strains the MIC ranged from 128 to more than 256 µg/ml, for Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris MIC was more than 256 µg/ml.
Keywords: paromomycin, cryptosporidiosis, minimal inhibitory concentration, Escherichia coli, calves, gastrointestinal diseases, gastrointestinal tract.
1ООО НВЦ Агроветзащита, |
Поступила в редакцию |
