БИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ
БИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ
ПЕЧАТНАЯ ВЕРСИЯ
ЭЛЕКТРОННАЯ ВЕРСИЯ
 
КАК ПОДАТЬ РУКОПИСЬ
 
КАРТА САЙТА
НА ГЛАВНУЮ

 

 

 

 

doi: 10.15389/agrobiology.2022.6.1188rus

УДК 636.2:591.39

Исследования выполнены при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 20-316-90003) и Минобрнауки России (тема 0445-2021-0004).

 

РЕЗУЛЬТАТИВНОСТЬ ПРИЖИЗНЕННОГО ПОЛУЧЕНИЯ ООЦИТОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ И ПОРОДЫ ТЕЛОК-ДОНОРОВ

Р.Ю. ЧИНАРОВ1, 2 , В.А. ЛУКАНИНА1, С.В. ПОЗЯБИН1,
Г.Н. СИНГИНА2

Прижизненное получение ооцитов (ovum pick-up, OPU) — важнейший элемент в системе получения эмбрионов коров in vitro (IVP). В этой связи повышение результативности OPU становится определяющим фактором для широкого внедрения IVP-технологии в разведение крупного рогатого скота. В представленной работе впервые показана возможность и эффективность получения OPU-ооцитов у коров ярославской породы. В ярославской породе по сравнению с симментальской установлена вариабельность числа фолликулов как между отдельными животными, так и между сессиями у одних и тех же животных. Мы не наблюдали статистически значимых различий в степени извлечения и качественных характеристиках ооцит-кумулюсных комплексов, что позволяет использовать стандартизированные протоколы для телок-доноров симментальской и ярославской пород. Целью настоящей работы было изучение влияния индивидуальных и породных особенностей телок-доноров симментальской и ярославской пород на результативность прижизненного получения ооцитов. Исследования проводили в ФИЦ ВИЖ им. Л.К. Эрнста в 2020-2022 годах на половозрелых клинически здоровых телках (Bos taurus taurus) симментальской и ярославской пород в возрасте от 17 до 36 мес. Ооциты получали методом трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов с интервалом между сессиями 7 сут в соответствии с методическими рекомендациями с использованием системы для OPU у крупного рогатого скота Bovine OPU («Minitube GmbH», Германия). В первом эксперименте изучали влияние на результативность OPU индивидуальных особенностей телок-доноров симментальской (n = 7, 50 сессий) и ярославской (n = 5, 25 сессий) пород. Во втором эксперименте оценивали результативность OPU в зависимости от породных особенностей телок-доноров симментальской (n = 6, 12 сессий) и ярославской (n = 5, 25 сессий) пород, используя параметры проведения OPU, оптимизированные для животных симментальской породы. Критериями оценки результативности OPU были число видимых с помощью УЗИ фолликулов, число извлеченных ооцитов в составе ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК), степень извлечения ОКК, доля ОКК, потенциально пригодных для использования в системе получения IVP эмбрионов, от общего количества извлеченных ОКК. Пригодными считали ОКК, у которых в ооцитах не было явных признаков аномалий цитоплазмы (дегенерация, лизис, сжатие, неправильная форма), за исключением созревших ОКК. Также к пригодным относили ооциты с гомогенной ооплазмой, лишенные полностью или частично клеток кумулюса. Мы наблюдали высокую вариабельность среднего числа УЗИ-видимых фолликулов между телками-донорами как симментальской (4,71-11,50 фолликулов;Cv = 47,9 %), так и ярославской пород (5,80-9,80 фолликулов, Cv = 32,0%), при этом различия между некоторыми донорами были высокодостоверны (p £≤0,001). Различия в числе УЗИ-видимых фолликулов приводили к различиям в числе получаемых ОКК между отельными донорами симментальской (2,33-5,17 ОКК) и ярославской пород (3,60-6,00 ОКК). Сравнительные исследования телок-доноров симментальской и ярославской пород не показали статистически значимых различий по среднему числу УЗИ-видимых фолликулов (7,33±0,62 и 6,96±0,45), получаемых (4,17±0,69 и 3,36±0,41) и пригодных ОКК (3,08±0,60 и 2,52±0,29), то есть технические (тип используемой аспирационной иглы и давление вакуума) и технологические параметры (кратность сессий) проведения OPU, оптимизированные для симментальской породы, могут быть использованы для ярославской породы без заметной потери результативности. Принимая во внимание высокую положительную корреляцию между числом пунктированных фолликулов и извлекаемых ОКК — r = 0,97 (p ≤ 0,01) и r = 0,72 (p ≤ 0,05) соответственно у телок-доноров симментальской и ярославской пород, для повышения результативности OPU целесообразно отбирать животных, характеризующихся большим числом УЗИ-видимых фолликулов.

Ключевые слова: крупный рогатый скот, вспомогательные репродуктивные технологии, OPU, получение эмбрионов in vitro.

 

 

THE INFLUENCE OF INDIVIDUAL FEATURES AND THE BREED OF DONOR HEIFERS ON THE EFFICIENCY OF OOCYTE RETRIEVAL BY OVUM PICK-UP

R.Yu. Chinarov1, 2✉, V.A. Lukanina1, S.V. Pozyabin1, G.N. Singina2

The oocytes’ retrieval from lived cows (Ovum Pick-Up, OPU) is the most important element in the system of in vitro production (IVP) of cow embryos. In this regard, increasing the efficiency of OPU is a key factor for the widespread implementation of IVP technology in cattle breeding. The present work shows for the first time the possibility of obtaining IVP embryos from OPU oocytes obtained from a local breed of Yaroslavl cows. In Yaroslavl breed comparing to Simmental breed, the variability of the number of follicles was observed both between individual animals and between sessions in the same animals. We did not observe significant differences in the recovery rate and qualitative characteristics of the obtained cumulus-oocyte complexes, which allows using standardized protocols for donor heifers of both Simmental and Yaroslavl breeds. The aim of our work was to study the influence of individual features and breed characteristics of donor heifers on the efficiency of oocyte production by OPU. The studies were carried out in the laboratory of experimental embryology in 2020-2022 on mature clinically healthy heifers of the Simmental and Yaroslavl breeds aged of 17 to 36 months. Oocytes were obtained by transvaginal ultrasound-controlled puncture of follicles with an interval between sessions of 7 days according to the methodical guidelines using systems Bovine OPU (Minitube GmbH, Germany). In the first experiment, the efficiency of OPU was studied in individual donor heifers of the Simmental (n = 7; 50 sessions) and Yaroslavl breeds (n = 5; 25 sessions). In the second experiment, a comparative study of the OPU efficiency in donor heifers of the Simmental (n = 6; 12 sessions) and Yaroslavl breeds (n = 5; 25 sessions) was carried out using OPU parameters optimized for animals of the Simmental breed. The OPU efficiency was evaluated using the following criteria: the number of ultrasound-visible follicles, the number of retrieved cumulus-oocyte complexes (COCs), the degree of oocyte retrieval, the ratio of oocytes suitable for production of IVP embryos from the total number of derived oocytes. We observed high variability of the average number of ultrasound-visible follicles among individual donor heifers, both of Simmental (4.71-11.50 follicles; Cv = 47.9 %) and Yaroslavl breeds (5.80-9.80 follicles, Cv = 32.0 %), while the differences between some donors within breeds were highly significant (p £ 0.001). Differences in the number of ultrasound-visible follicles led to differences in the number of derived COCs among individual donors, both of Simmental (2.33-5.17 COCs) and Yaroslavl breeds (3.60-6.00 COCs). Comparative studies of donor heifers of the Simmental and Yaroslavl breeds did not show significant differences in the average number of ultrasound-visible follicles (7.33±0.62 vs. 6.96±0.45), the number of obtained oocytes (4.17±0.69 vs. 3.36±0.41) and the number of suitable oocytes (3.08±0.60 vs. 2.52±0.29). Thus, a high variability in the average number of ultrasound-visible follicles and the number of obtained oocytes between individual donor heifers of the Simmental and Yaroslavl breeds was established. Considering the high positive correlation between the number of aspirated follicles and the number of retrieved oocytes (r = 0.97 and 0.72 for donor heifers of the Simmental and Yaroslavl breeds, respectively), it is advisable to select animals characterized by a large number of ultrasound-visible follicles to increase the efficiency of OPU. The absence of significant differences related to quantitative and qualitative characteristics of the retrieved oocytes allows us to recommend the OPU parameters optimized for donor heifers of the Simmental breed to be applied in heifers of the Yaroslavl breed without a noticeable loss of efficiency.

Keywords: cattle, assisted reproductive technologies, OPU, in vitro embryo production.

 

1ФГБОУ ВО Московская государственная академия
ветеринарной медицины и биотехнологии —
МВА им. К.И. Скрябина,

109472 Россия, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23,
e-mail: roman_chinarov@mail.ru ✉, kristybatle@gmail.com, vet-surgery@mgavm.ru;
2ФГБНУ ФИЦ животноводства — ВИЖ им. академика Л.К. Эрнста,
142132 Россия, Московская обл., г.о. Подольск, пос. Дубровицы, 60,
e-mail: g_singina@mail.ru

Поступила в редакцию
18 августа 2022 года

 

назад в начало

 


СОДЕРЖАНИЕ

 

 

Полный текст PDF

Полный текст HTML