doi: 10.15389/agrobiology.2020.4.750rus
УДК 636.4:591.1:636.084
Исследования проведены при финансовой поддержке РНФ по проекту № 19-16-00068.
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ДВУХ КОРМОВЫХ
АНТИОКСИДАНТОВ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО
СТРЕССА У СВИНЕЙ (Sus scrofa domesticus Erxleben, 1777)
Ю.П. ФОМИЧЕВ1, Н.В. БОГОЛЮБОВА1, Р.В. НЕКРАСОВ1,
М.Г. ЧАБАЕВ1, Р.А. РЫКОВ2, А.А. СЕМЕНОВА2
Условия интенсивного животноводства во многом не соответствуют физиологии сельскохозяйственных видов, сложившейся в процессе эволюции, что наиболее негативно сказывается на высокопродуктивных особях с напряженным обменом веществ. Одно из решений проблемы — использование кормовых антиоксидантов для улучшения продуктивного здоровья, повышения адаптационных возможностей и стрессоустойчивости поголовья. Эффективность применения таких адаптогенов зависит от того, насколько детально изучены механизмы их воздействия на физиолого-биохимические процессы в организме. Мы сравнили эффекты антиоксидантных корригирующих препаратов при моделировании одного из самых распространенных технологических стрессов — социального на 36 помесных боровках F2 (крупная белая × ландрас) × дюрок (масса в начале опыта 35 кг), из которых сформировали 4 группы по 9 особей: I группа — контрольная без модельного стресса (МС), II — контрольная с МС без коррекции, III и IV группы — МС с коррекцией адаптогенами (соответственно протеинат Se — ПSe и дигидрокверцетин — ДКВ; 0,2 и 32 мг по д.в. на 1 кг корма). Кровь для исследований брали в начале, середине и в конце эксперимента у 5 особей из каждой группы. Установлено, что с возрастом содержание кортизола в сыворотке крови всех свиней по группам снижалось на 36,8; 22,5; 41,3 и 52,8 % относительно исходных значений, повышаясь к завершению откорма соответственно на 46,4; 37,4; 8,1 и 60,4 %. Наибольшую концентрацию кортизола наблюдали в III группе (с ПSe) в период интенсивного роста (282 нмоль/л против 211 и 214 нмоль/л в I и II контрольных группах), к концу откорма в первых трех группах показатель составил 309, 294 и 305 нмоль/л, а наименьшим он был в IV группе (с ДКВ) — 134 нмоль/л (p = 0,07 по сравнению со II контрольной группой) в период интенсивного роста и 215 нмоль/л при заключительном откорме, что корреспондируется с данными по ТБК АП (активные продукты, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой), которых тоже было меньше соответственно на 6,7 и 12,3 %. В I группе активность ЛДГ в течение опыта снижалась с 459,4 до 377,5 ед/л, то же отмечали в IV группе (с ДКВ). Во II и III (ПSe) группах к концу откорма показатель по ЛДГ снизился до 317,0 и 289,3 ед/л и стал меньше, чем в I группе, на 16,0 (р < 0,01) и 23,4 (р < 0,01) %. В IV группе он тоже постоянно снижался и оставался на 15,0; 7,0 (p = 0,06 при сравнение со II группой) и 2,7 % ниже, чем в I, II и III группах. МС во II группе снижал концентрацию глюкозы на 13,8 % относительно I (p < 0,05) при заключительном откорме, в III — также был ниже на 7,4 % (p < 0,05), но под влиянием ПSe превышал на 7,4 % таковой во II группе. ДКВ в рационе нивелировал отрицательные эффекты МС, что в сочетании с низким уровнем кортизола стабилизировало концентрацию глюкозы в пределах контроля без МС (I группа). ДКВ также способствовал повышению концентрации триглицеридов в период заключительного откорма — на 25 % (р < 0,01) по сравнению с I группой (без стресса). МС способствовал мобилизации клеточного иммунитета: в конце опыта фагоцитарная активность (ФА) (р < 0,05), фагоцитарный индекс (ФИ) (р < 0,001), фагоцитарное число (ФЧ) (р < 0,05) повышались у животных из II группы (МС без коррекции). Применение адаптогенов ПSe и ДКВ нормализовало эти показатели относительно II группы и практически до значений без МС (ФИ при р < 0,01, ФЧ при р < 0,01 в первом и р < 0,05 — во втором случае). Таким образом, под действием адаптогенов показатели резистентности в конце опыта соответствовали отмеченным в I группе, а ДКВ дополнительно повышал гуморальный иммунитет по сравнению с I группой (р < 0,05). Отметим, что на фоне отсутствия существенных различий (р > 0,05) по большинству изученных биохимических показателей (что свидетельствует о сбалансированности рационов) выделялись изменения, характеризующие воздействие используемых адаптогенов при МС. Во II-IV группах содержание фосфора в крови было выше, чем в I: 4,42 (p = 0,07), 4,52 (p = 0,1) и 4,64 ммоль/л (p < 0,05) против 3,94 ммоль/л. Значительно менялось соотношение Са/Р: во II (МС), III (МС + ПSe) и IV (МС + ДКВ) группах оно было ниже и составило 1,01 (p < 0,05), 0,99 (p < 0,05) и 0,89 (p < 0,001) против 1,15 в I группе (без МС и адаптогенов). Число лейкоцитов крови во II, III и IV группах было выше, чем в I группе: в середине откорма — на 12,5; 5,4 и 6,1 %, при заключительном откорме — на 32,5 (р < 0,05); 40,1 (р < 0,05) и 21,7 % (р = 0,07). Характерным было динамическое снижение численности эритроцитов и повышение содержания гемоглобина во всех группах: эти два показателя к завершению откорма в группах с МС были выше, чем в I (на 6,6; 14,3; 9,7 % и на 1,09; 6,09 и 4,27 %). Также отметим рост содержания эритроцитов (р < 0,05), гемоглобина (р < 0,05) и повышение гематокрита (р < 0,01) в III группе (ПSe) по сравнению со II, что свидетельствует о важной роли Se как антиоксиданта. Наблюдаемые изменения были связаны как с действием кортизола в условиях физиологического стресса, так и с повышением неспецифической резистентности животных под влиянием адаптогенов. Среднесуточный прирост массы в опыте был близок к генетически возможному для генотипа F2 (крупная белая × ландрас) × дюрок: в среднем по группам 1047, 1035, 1003 и 1042 г (наибольший — в отсутствие МС и при коррекции ДКВ). Выявленные нами эффекты указывают на перспективность применения ПSe и ДКВ в интенсивном свиноводстве, поэтому необходимо продолжить изучение механизмов действия этих кормовых адаптогенов.
Ключевые слова: стресс, свиньи, адаптогены, антиоксиданты, дигидрокверцетин, селен, кортизол, лактатдегидрогеназа, гематологические показатели, креатинфосфокиназа, ТБК-активные продукты, неспецифическая резистентность.
Yu.P. Fomichev1, N.V. Bogolyubova1, R.V. Nekrasov1, M.G. Chabaev1, R.A. Rykov1, A.A. Semenova2
Intensive livestock technologies do not fit well with the physiology of domestic species and put farm animals at risk of various health problems and disorders, which most negatively affects highly productive animals with intensive metabolism. Feed antioxidants might be a solution to improve productive health, adaptive capabilities and stress resistance of livestock. The outcome of adaptogen application depends on thorough elucidation of mechanisms of their action on physiological and biochemical processes in the body compromised by stress. Our study imitated social stress (modeled stress, MS) as the most common in intensive livestock to compare two dietary antioxidant additives of different origin and chemical composition. Thirty-six hybrid boars F2 (Large White × Landrace) × Duroc aged 103 days (35 kg live weight) were assigned for four treatments (9 animals per each): 1 — control without MS, 2 — control with MS, 3 — MS + proteinate Se (PSe) (B-TRAXIM Selenium-11, PANCOSMA CANADA, Inc.; 0.2 mg a.i. per 1 kg feed), and 4 — MS + dihydroquercetin (DHQ) Ekostimul-2 drug (ООО Ametic, Russia; 32 mg a.i. per 1 kg feed). To simulate social stress, boars were moved every 14 days within the group to change the neighbors. Blood for assay was sampled three times over the trial from five boars of each group. With age, the blood cortisol level was revealed first to decrease by 36.8. 22.5, 41.3 and 52.8 % from the initial values in groups 1, 2, 3 and 4, respectively, though by the end of the final feeding there was a 46.4; 37.4; 8.1 and 60.4 % increase in the parameter. The cortisol concentration was the highest in group 3 (MS + PSe) during intensive growth (282 nmol/l vs. 211 and 214 nmol/l for groups 1 and 2). In groups 1, 2 (MS), and 3 (MS + PSe), the cortisol concentration reached 309, 294 and 305 nmol/l by the end of feeding. Blood cortisol level was the lowest in group 4 (+ DHQ), 134 nmol/l (p = 0.07 compared to group 2) at intensive growth and 215 nmol/l at final fattening, corresponding with TBK AP levels which were also 6.7 and 12.3 % lower, respectively. Lactate dehydrogenase (LDH) activity and creatine phosphokinase (CPK) activity also altered. In group 1, LDH activity decreased from 459.4 to 377.5 IU/l over the trial. The same pattern was characteristic of group 4 (MS + DHQ). In group 2 (MS) and group 3 (MS + PSe), LDH activity declined to 317.0 and 289.3 IU/l by the end of feeding, which was 16.0 (p < 0.01) and 23.4 % (p < 0.01) less than in group 1. In group 4, the index, being constantly decreasing over the trial as in group 1, remained 15.0, 7.0 (p = 0.06 compared to control group 2 with MS) and 2.7 % lower than in groups 1, 2 and 3. The MS lowered the blood glucose concentration by 13.8 % (p < 0.05) compared to control 1 during the final fattening period. In group 3, this indicator as influenced by MS was also 7.4 % lower (p < 0.05), but due to PSe, a 7.4 % increase occurred compared to control group 2. Dietary DHQ led to the leveling of negative effects of MS, which, together with low cortisol indices in this group, stabilized the blood glucose concentration at the control level without MS in group 1. The DHQ was found to also contribute to a 25 % (p <0.01) increase in blood triglycerides during final fattening compared to group 1 without stress. Pigs also differed in pathogenetic resistance. MS mobilized the cellular immunity through an increase in phagocytic activity PA (p < 0.05), phagocytic index PI (p < 0.001), and phagocytic number PN (p < 0.05) in control group 2 at the end of the test. PSe and DHQ normalized these indicators compared to control (group 2) practically to the control values without MS (p < 0.01 for PI; p < 0.01 and p < 0.05 for PN, respectively). Thus, in animals fed adaptogens, the resistance indices at the end of the experiment corresponded to those in the control group 1, which indicates higher stress resistance, and DHQ additionally promoted humoral immunity as compared to the control group 1 (p < 0.05), which confirms the ability the adaptogens to enhance the body resistance to stress. Interestingly, despite the absence of statistically significant differences between most of the studied biochemical parameters (p > 0.05) which indicate a balanced animal diet, changes were noted that characterize the effect of the adaptogens under MS. In groups 2-4, blood phosphorus concentration was higher than in control group 1, 4.42 (p = 0.07), 4.52 (p = 0.1) and 4.64 mmol/l (p < 0.05) vs. 3.94 mmol/l. Thereof, the Ca/P ratio changed significantly during fattening. In group 2 (MS), group 3 (MS + PSe) and group 4 (MS + DHQ), the values 1.01 (p < 0.05), 0.99 (p < 0.05) and 0.89 (p < 0.001) vs. 1.15 in group 1 without stress. Blood morphology in pigs also changed as influenced by MS and the adaptogens. The counts of blood leukocytes in groups 2, 3 and 4 was 12.5; 5.4 and 6.1 % higher than in group 1 in the middle of fattening period, and 32.5 (p < 0.05), 40.1 (p < 0.05) and 21.7 % (p = 0.07) higher at the final fattening. A decrease in the number of erythrocytes and an increase in the hemoglobin amount in blood were characteristic of all groups. In general, by the end of feeding animals subjected to MS these two indicators were 6.6, 14.3, 9.7 % and 1.09, 6.09, 4.27 % higher than in group 1. An increase in blood erythrocytes (p < 0.05), hemoglobin (p < 0.05) and hematocrit (p < 0.01) in animals fed selenium vs. control group 2 indicates a decisive role of Se adaptogen as antioxidant during fattening. The observed changes were associated both with the action of cortisol generated by physiological stress, and with an increase in nonspecific resistance of boars due to the adaptogens. Importantly, the average daily weight gain in boars was close to that genetically conditioned for the genotype F2 (Large White × Landrace) × Duroc. As a result, over the entire period of the trial, groups 1, 2, 3, and 4 showed an average increase of 1047, 1035, 1003 and 1042 g, respectively, of which the weight gain was the greatest in control 1 (without stress) and in group 4 fed DHQ at MS. Thus, our findings give grounds for further studying effects of these feed adaptogens for their proper use in intensive industrial pig breeding.
Keywords: stress, pigs, adaptogens, antioxidants, dihydroquercetin, selenium, cortisol, lactate dehydrogenase, hematological indicators, creatine phosphokinase, TBA-active products, nonspecific resistance.
1ФГБНУ Федеральный научный центр |
Поступила в редакцию |
