Сельскохозяйственная биология, 2013, № 4, с. 70-75.

doi: 10.15389/agrobiology.2013.4.70rus

УДК 579.62:579.869.1.083.18

ПОДХОДЫ К КЛАССИФИКАЦИИ ИЗОЛЯТОВ Listeria monocytogenes ПО ВИРУЛЕНТНОСТИ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

И.Ю. ЕГОРОВА

Патогенность листериозных культур принято определять качественно при постановке кератоконъюнктивальной пробы на морских свинках. Этим методом штаммы можно разделить на две основные группы — патогенные и непатогенные, что, в свою очередь, не позволяет проводить внутривидовое типирование патогена, необходимое для установления источника инфекции и путей ее распространения, а также оценку эпидемической значимости изолятов, выделяемых из объектов внешней среды и пищевой продукции. Целью представляемой работы было изучение патогенности различных культур Listeria monocytogenes и разработка подходов к созданию системы классификации изолятов листерий по вирулентности для аутбредных белых мышей. Обнаружено, что сезоны года, состав и вид питательных сред не оказывают существенного влияния на показатели вирулентности для использованных лабораторных животных. При этом установлено, что наиболее объективным показателем для проведения внутривидового типирования изолятов L. monocytogenes служит LD₅₀. На основе анализа результатов определения LD₅₀ для белых аутбредных мышей у 30 культур L. monocytogenes разработана классификация изолятов листерий по их вирулентности. С использованием предложенной классификации показана неоднородность вида L. monocytogenes по проявлению вирулентных свойств в отношении белых аутбредных мышей. Разработанные подходы к оценке вирулентности культур L. monocytogenes позволили провести дифференциацию изолятов листерий по патогенности.

Ключевые слова: Listeria monocytogenes, белые мыши, вирулентность, LD₅₀.

Полный текст

APPROACH TO CLASSIFICATION of Listeria monocytogenes ISOLATES ON THEIR VIRULENCE FOR THE EXPERIMENTAL ANIMALS

A pathogenicity of Listeria isolates is usually determined in the qualitative kerato-conjunctival test on guinea pigs. That test allows to subdivided the strains into two main groups, i.e. pathogenic and non-pathogenic, but not to carry out an intraspecific typing of the pathogen, which is necessary for establishing the source of infection and the ways of its expansion, and also for the evaluation of epidemiological significance of isolates from the environment and food products. In our study, the pathogenicity of different Listeria monocytogenes cultures was investigated in test with outbred white mice, and the approach to Listeria classification is proposed on the base of the virulence manifested after an intraperitoneal injection of different bacterial culture. It is shown that the seasons, as well as the composition and type of media, used for bacteria cultivation, did not affect significantly the virulence of the isolates for laboratory animals. The LD₁₀₀ and LD₅₀ were estimated, and LD₅₀ was found to be the most reliable index for intraspecific typing of L. monocytogenes isolates. The LD₅₀ for white outbred mice was estimated in 30 cultures of L. monocytogenes. According to the LD_50/min and LD_50/max, all isolates were divided into five groups, which can be designated as a highly virulent strains (LD_50/min and LD_50/max within 104 to 106 colony-forming unit per animal), virulent strains (LD_50/min and LD_50/max of 10⁶ to 10⁷ CFU per animal), the strains of moderate virulence (LD_50/min and LD_50/max of 10⁷-10⁸ CFU per animal) and low virulence (LD_50/min and LD_50/max within 10⁸-10⁹ CFU per animal), and the avirulent ones, which LD₅₀ has not been titrated (LD₁₀₀ more then 10⁹ CFU per animal).

Keywords: Listeria monocytogenes,white mice, virulence, LD₅₀.