Сельскохозяйственная биология, 2011, № 4, с. 102-107.

УДК 636.2:636.084.1:636.085.16

О ВЛИЯНИИ КОНЦЕНТРИРОВАННОЙ СЫВОРОТКИ КРОВИ И САХАБАКТИСУБТИЛА НА ОРГАНИЗМ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ

Н.Е. ГОРКОВЕНКО¹, Ю.А. МАКАРОВ¹, Н.Н. ШУЛЬГА¹, Н.П. ТАРАБУКИНА²

Исследовали биохимические показатели крови и показатели естественной резистентности, а также микробиоценоз кишечника у новорожденных телят черно-пестрой породы при выпаивании концентрированной сыворотки крови и сахабактисубтила. Оба препарата оказывали положительное действие на иммунобиологический статус и формирование энтеробиоценоза, способствовали увеличению сохранности и среднесуточного прироста массы у животных.

Ключевые слова: новорожденные телята, микробиоценоз кишечника, острые кишечные расстройства, иммунобиологический статус, концентрированная сыворотка крови, сахабактисубтил.

В настоящее время ведущим направлением фармакотерапии сопровождающихся диареей острых кишечных расстройств (ОКР) у телят остается использование антибиотиков, которые часто оказывают негативное влияние на иммунный статус животного, способствуют выработке полирезистентности у микроорганизмов и повышению их вирулентности (1-4). С увеличением скорости внедрения новых химико-фармацевтических препаратов растет лекарственная устойчивость к ним у патогенных и условно-патогенных бактерий.
Безопасной альтернативой антибиотикам могут стать пробиотические препараты, созданные на основе бактерий-антагонистов условно-патогенных и патогенных бактерий. Пробиотики стимулируют неспецифическую резистентность животных, улучшают переваривание кормов, способствуют нормализации кишечного микробиоценоза. Один из таких препаратов — сахабактисубтил (СБС), разработанный в Якутском НИИ сельского хозяйства на основе штаммов Bacillus subtilis.
Другая группа препаратов — аллогенные иммунные сыворотки (АС), включающие факторы неспецифической защиты и иммуноглобулины. АС повышают устойчивость организма к воздействию вредных агентов, предупреждают возникновение заболеваний и благоприятно влияют на рост и развитие молодняка. Однако они имеют определенные недостатки, в числе которых большая профилактическая и лечебная доза препарата, относительно низкое содержание иммунных белков.
Концентрированная сыворотка крови (КСК), разработанная в Дальневосточном зональном научно-исследовательском ветеринарном институте, включает в себя биологически активные ингредиенты в концентрации, в 2,5-3,0 раза превышающей таковую в аллогенной сыворотке (5). Кроме того, КСК содержит набор антител к патогенным и условно-патогенным бактериям, персистирующим в популяциях животных на тех фермах, где содержатся доноры.
Цель настоящей работы состояла в изучении влияния концентрированной сыворотки крови и сахабактисубтила на количественный и качественный состав энтеробиоценоза, биохимические показатели крови и показатели естественной резистентности у новорожденных телят.
Методика. Исследования проводили в 2008-2009 годах на телятах черно-пестрой породы. Были сформированы опытные и контрольные группы животных (по 6 гол. в каждой). Телята I, III и V групп содержались в ОПХ Всероссийского НИИ сои (Амурская обл.), животные II, IV и VI групп — на молочно-товарной ферме (МТФ) «Семиозерка» (Амурская обл.).
Телятам из I и II опытных групп вместе с молозивом выпаивали концентрированную сыворотку крови, полученную от доноров в этих же хозяйствах: с профилактической целью — в дозе 50 мл один раз в сутки в течение 3 сут, с лечебной целью (в случае возникновения ОКР) — в дозе 50 мл 3 раза в сутки до исчезновения клинических признаков заболевания (ОКР). Телята из III и IV опытных групп получали сахабактисубтил для профилактики (10 мл 1 раз в сутки) и лечения ОКР (10 мл 3 раза в сутки до исчезновения клинических признаков). В контрольных группах телят (V и VI) применяли меры профилактики и лечения, принятые в хозяйствах.
В течение 30 сут от начала опыта отслеживали клиническое состояние, заболеваемость, сохранность телят. Прирост живой массы учитывали в течение 2 мес. Кровь для исследования брали у животных в начале опыта, через 10 и 30 сут. В крови определяли число эритроцитов, лейкоцитов, лейкоформулу и содержание гемоглобина общепринятыми методами, в сыворотке крови — количество общего белка рефрактометрически, иммуноглобулины цинк-сульфатным методом, фагоцитарную активность нейтрофилов, лизоцимную и бактерицидную активность сыворотки крови в соответствии с описанными методиками (6).
Для оценки количественного и качественного состава кишечного микробиоценоза у телят брали пробы фекалий в начале и в конце эксперимента (соответственно 1-е и 2-е исследование). Для выделения и количественного учета аэробной и факультативно-анаэробной микрофлоры из фекалий готовили серию 10-кратных разведений (от 1:10 до 1:1010) в физиологическом растворе с высевом по 0,1 мл на агаризованные питательные среды — МПА, Эндо, Плоскирева, Чапека, висмут-сульфит агар, энтерококкагар, солевой агар, кровяной агар. На каждой из селективных сред учитывали число выросших колоний определенного типа, умножали на степень разведения и коэффициент, обратный количеству посеянного материала; полученное значение выражали в lg КОЕ/г. Культурально-морфоло-гические и биохимические свойства выделенных бактерий изучали общепринятыми методами (7, 8).
Статистическую обработку выполняли c использованием стандартного пакета программ Microsoft Excel.
Результаты. К 30-м сут наблюдения количество гемоглобина в крови у животных из I, III и IV групп увеличилось соответственно на 18,4; 6,5 и 18,7 % по сравнению с началом опыта (табл. 1). У телят из контрольных групп этот показатель или уменьшался (VI группа), или не изменялся и был ниже физиологической нормы. При этом число эритроцитов в крови у телят из V и VI контрольных групп снизилось соответственно в 1,1 и 1,8 раза.
Содержание общего белка и иммуноглобулинов в сыворотке крови у телят как в опытных, так и в контрольных группах на протяжении всего периода наблюдений было подвержено колебаниям, однако оставалось в пределах физиологической нормы.
Наиболее существенное влияние КСК и СБС оказали на гуморальное звено иммунной системы телят. Лизоцимная активность сыворотки крови (ЛАСК) у животных I, II и III групп к концу наблюдений по сравнению с 1-ми сут увеличилась соответственно в 1,3; 1,2 и 1,7 раза. У телят V и VI групп она снизилась в 1,8 и 2,5 раза. Бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) у телят I-IV групп достоверно увеличилась. Стимулирующее влияние КСК на гуморальное звено иммунной системы обусловлено тем, что сыворотка содержит факторы неспецифической защиты, которые всасываются в кишечнике новорожденных телят и поступают непосредственно в кровяное русло. При выпаивании телятам СБС в результате лизиса пробиотических бактерий в кишечнике образуется мурамилдипептид — стимулятор иммуногенеза (9).

Изменение показателей клеточного звена иммунитета под влиянием КСК и СБС отмечали у животных из II и IV групп. Фагоцитарная активность (ФА) лейкоцитов на 30-е сут достоверно увеличилась соответственно на 22,1 и 36,3 % (р < 0,001). При этом у телят из V и VI групп к концу опыта ФА снизилась на 12,5 и 23,6 %. Механизм влияния СБС на клеточное звено иммунитета состоит в антигенной стимуляции макрофагов пептидогликаном бактерий-пробионтов. КСК содержит медиаторы (интерлейкины), стимулирующие фагоцитоз (9).
Число видов грамотрицательных бактерий в этиологически значимых ассоциациях, выделенных от телят из I-IV групп в начале эксперимента, составляло от 2,75±0,20 до 3,00±1,00. К концу опыта в энтеробиоценозе животных, получавших СБС, этот показатель снизился до 2,00-2,30, тогда как у телят, получавших КСК, практически не изменился и составил 2,00-2,60. У телят из V группы к концу эксперимента он также не изменялся и составил 4,00, в VI группе отмечали снижение до 2,00.
У телят, получавших КСК, количество лактозопозитивных кишечных палочек (Л+КП) к концу опыта достоверно увеличилось на 15,1 % в I группе и снизилось на 20,9 % во II группе (табл. 2). У животных в III группе численность Л+КП незначительно уменьшилась, в IV группе она достоверно снизилась на 22,6 % — до 7,65±0,35 lg КОЕ/г. В микробиоценозе толстого кишечника у телят V и VI групп отмечали незначительные колебания количества Л+КП (различия статистически недостоверны). При этом показатель превышал численность Л+КП, характерную для эубиоза, и составлял от 9,70±0,36 до 10,10±0,30 lg КОЕ/г.

Количество энтерококков в микробиоценозе кишечника у телят из опытных и контрольных групп оставалось неизменным в начале и в конце опыта или незначительно колебалось. Исключение составили особи из III и V группы, у которых численность Enterococcus faecium к концу опыта достоверно снизилась соответственно на 14,1 и 18,1 %.
Количество стафилококков в энтеробиоценозе у телят из II, IV и VI групп к концу опыта снизилось, однако достоверное изменение отмечали только в IV группе (р < 0,05). У телят из I и III групп на протяжении эксперимента численность стафилококков соответствовала показателям, характерным для эубиоза. У животных из V группы количество стафилококков увеличилось в 1,4 раза (8,10±0,05 lg КОЕ/г, р < 0,001), что свидетельствует о дисбиотических нарушениях в кишечнике.
Такие изменения энтеробиоценоза объясняются вытеснением условно-патогенной микрофлоры штаммами Bacillus subtilis сахабактисубтила и нейтрализующим воздействием антител концентрированной сыворотки крови на условно-патогенную микрофлору энтеробиоценоза телят.
Благодаря применению КСК и СБС снизилась заболеваемость телят острыми кишечными расстройствами и улучшилась их сохранность. У телят из опытных групп, содержащихся на МТФ «Семиозерка», в течение периода наблюдения не регистрировали заболеваний желудочно-кишечного тракта, у 50,0 % животных контрольной группы наблюдались острые кишечные расстройства. В опытных группах телят в ОПХ ВНИИ сои ОКР регистрировали у 25,0 % особей, в контрольной группе заболело 66,7 % животных. Сохранность телят, получавших КСК, составила 100 %, получавших СБС — 75,0 %, в контрольной группе — 67,0 %.

Среднесуточный прирост живой массы у телят контрольной группы (в) и телят, получавших концентрированную сыворотку крови (а) или сахабактисубтил (б) в двух хозяйствах (Амурская обл., 2009 год).

Применение КСК и СБС способствовало более интенсивному росту животных в первые 2 мес жизни. Среднесуточный прирост массы у телят, содержащихся в ОПХ ВНИИ сои и на МТФ «Семиозерка» и получавших СБС, превосходил аналогичный показатель у животных из контрольных групп соответственно в 1,6 и 1,4 раза (рис.). У телят, получавших КСК, среднесуточный прирост массы был в 1,3 и 1,1 раза выше, чем в контроле.
Таким образом, концентрированная сыворотка крови (КСК) и сахабактисубтил (СБС) положительно влияют на биохимические показатели крови и естественную резистентность у новорожденных телят. Эти препараты стимулируют эритропоэз, активируют неспецифические факторы гуморального и клеточного иммунитета животных, позитивно сказываются на формировании микробиоценоза толстой кишки у телят. Сахабактисубтил способствует снижению численности лактозоположительных кишечных палочек. Оба препарата оказывают сдерживающее воздействие на развитие кокковой микрофлоры, снижают число видов грамотрицательных бактерий в ассоциациях энтеробиоценоза. Кроме того, КСК и СБС способствуют увеличению среднесуточного прироста живой массы. Полученные данные свидетельствуют об эффективности применения концентрированной сыворотки крови и сахабактисубтила для профилактики и лечения острых кишечных расстройств у новорожденных телят.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. М о т о р ы г и н  А.В.,  Л е н ч е н к о  Е.М. Определение качественного и количественного состава микроорганизмов при дисбактериозе кишечника у телят. С.-х. биол., 2011, 2: 103-107.
2. З о л о т у х и н  С.Н.,  П у л ь ч е р о в с к а я  Л.П.,  К а в р у к  Л.С. Неспецифическая профилактика смешанной кишечной инфекции телят и поросят. Практик, 2006, 6: 72-76.
3. Ш а х о в  А.Г. Этиология и профилактика желудочно-кишечных и респираторных болезней телят и поросят. Ветеринарная патология, 2003, 6(2): 25-28.
4. Б е д о е в а  З.М.,  В о р о н и н  Е.С.,  Д е в р и ш о в  Д.А.,  З а й ц е в а  Е.В. Разработка средств иммунологического мониторинга и прогнозирования острых кишечных инфекций бактериальной этиологии. Вест. РАСХН, 2006, 3: 63-73.
5. М а к а р о в  Ю.А.,  Ш у л ь г а  Н.Н.,  Г о р к о в е н к о  Н.Е. Руководство по изготовлению и применению концентрированной сыворотки крови крупного рогатого скота: метод. реком. Благовещенск, 2008.
6. Методические рекомендации по оценке и коррекции неспецифической резистентности животных. Воронеж, 2005.
7. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции: справочник /Под ред. Б.И. Антонова. М., 1986.
8. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования /Под ред. М.О. Биргер. М., 1967.
9. К р а с о ч к о  П.А.,  Я к у б о в с к и й  М.В.,  К р а с о ч к о  И.А.  Иммунокоррекция в клинической ветеринарной медицине /Под. ред. П.А. Красочко. Минск, 2008.

ON THE INFLUENCE OF CONCENTRATED BLOOD SERUM AND SAHABACTISUBTIL ON NEWBORN CALVES

N.E. Gorkovenko¹, Yu.A. Makarov¹, N.N. Shul’ga¹, N.P. Tarabukina²

The authors studied the influence of concentrated blood serum and Sahabactisubtil on biochemical indices of blood and the indices of natural resistance, and also on microbiocenosis of the intestine in newborn calves of Black-and-White breed. Both preparations take positive effect on immunobiological status and formation of enterobiocenosis, promote to raising of safety and average daily gain in calves.

Keywords: newborn calves, intestinal microbiocenosis, acute intestinal disorders, immunobiological status, concentrated blood serum, sachabaktisubtil.

Оформление электронного оттиска