doi: 10.15389/agrobiology.2013.2.58rus

УДК 636.52/.58:573.6.086.83:636.082

ИНТЕГРАЦИЯ И ЭКСПРЕССИЯ МАРКЕРНЫХ ГЕНОВ В ЭМБРИОНАХ КУР ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕТРОВИРУСНЫХ ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ ВЕКТОРОВ

Н.А. ВОЛКОВА1, Л.А. ВОЛКОВА1, И.К. ФОМИН1, Н.А. ЗИНОВЬЕВА1, Л.Ш. ГОРЕЛИК2, Н.С. ЛОЦМАНОВА3

Изучена эффективность переноса экзогенной ДНК в эмбрионы кур in vivo с использованием ретровирусных векторов. Генные конструкции содержали маркерный ген GFP под контролем промотора ранних генов цитомегаловируса человека CMV IE (конструкция pLNCgfp) или промотора вируса лейкемии мышей Молони Mo-MuLV (конструкция pLgfpSN). Для доставки ретровирусных векторов использовали две пакующие линии — GP + envAM12 и PT67. Установлена высокая эффективность трансформации эмбрионов при использовании генной конструкции pLNCgfp (до 18,8 %). Показана экспрессия маркерного гена в клетках 5- и 15-суточ-ных эмбрионов кур.

Ключевые слова: клеточная инженерия, трансгенез, ретровирусные векторы, куры.

 

Полный текст

 

INTEGRATION AND EXPRESSION OF MARKER GENES IN CHICKEN EMBRYOS WITH THE USE OF RETROVIRAL VECTOR

N.A. Volkova1, L.A. Volkova1, I.K. Fomin1, N.A. Zinovieva1, L.Sh. Gorelik2, N.S. Lotsmanova3

The efficiency was investigated of transfer of exogenous DNA to chicken embryos in vivo with the use of retroviral vectors. The gene construction involves a marker gene GFT under control of promoter of yearly genes of human cytomegalovirus CMV IE (pLNCgfp) or promoter of Moloney leukemia virus Mo-MuLV (pLgfpSN). Two packing lines GP + envAM12 and PT67 were used for the delivery of retroviral vectors. It was established the high efficiency of embryo transformation with the use of pLNCgfp gene construction (up to 18.8 %). The expression of marker gene was demonstrated in cells of 5- and 15-day age chicken embryos.

Keywords: cell engineering, transgenesis, retrovirus vectors, chicken.

1ГНУ Всероссийский НИИ животноводства
Россельхозакадемии
,
142132 Россия, Московская обл., Подольский р-н, пос. Дубровицы,
e-mail: natavolkova@inbox.ru;
2ФГБОУ ВПО Уральская государственная академия ветеринарной медицины,
457100 Россия, Челябинская обл., г. Троицк, ул. Гагарина, 13,
e-mail: natavolkova@inbox.ru;
3ГБОУ СПО Медицинское училище № 15
Департамента здравоохранения г. Москвы,

109263 Россия, г. Москва, ул. Шкулева, 4а,
e-mail: natavolkova@inbox.ru

Поступила в редакцию
19 января 2013 года

 

Оформление электронного оттиска

назад в начало